Центрифужна пробірка — це проста пробірка, яка може витримувати високу швидкість обертання та тиск, наприклад для відокремлення деяких зразків і відокремлення осадів супернатанту.Ультрафільтраційна центрифужна трубка складається з двох частин, подібних до внутрішньої та зовнішньої трубок.Внутрішня трубка являє собою мембрану з певною молекулярною масою.Під час високошвидкісного центрифугування речовини з меншою молекулярною масою витікають у нижню трубку (тобто зовнішню трубку), а ті з більшою молекулярною масою потрапляють у верхню трубку (тобто внутрішню трубку).Це принцип ультрафільтрації, який часто використовується для концентрування зразків.
Ультрафільтраційні центрифужні пробірки зазвичай можна використовувати без попередньої обробки, але для обробки зразків білка, особливо для розведених розчинів білка (< 10 мкг/мл), швидкість відновлення концентрації за допомогою ультрафільтраційних мембран часто не є кількісною.Хоча PES матеріали мінімізують неспецифічну адсорбцію, деякі білки, особливо коли вони розведені, можуть мати проблеми.Ступінь неспецифічного зв'язування залежить від структури окремих білків.Білки, що містять заряджені або гідрофобні домени, швидше за все, необоротно зв’язуються з різними поверхнями.Пасиваційна попередня обробка поверхні ультрафільтраційної центрифужної трубки може зменшити втрату адсорбції білка на поверхні мембрани.У більшості випадків попередня обробка колонки перед концентруванням розбавленого розчину білка може підвищити швидкість відновлення, оскільки розчин може заповнити порожні місця адсорбції білка, відкриті на мембрані та поверхні.Метод пасивації полягає в попередньому замочуванні колонки більшим об’ємом пасиваційного розчину протягом більше ніж 1 години, ретельному промиванні колонки дистильованою водою, а потім центрифугуванні з дистильованою водою для повного видалення пасиваційного розчину, який може залишитися на плівці. .Слідкуйте за тим, щоб плівка не висохла після пасивації.Якщо ви хочете використовувати його пізніше, вам потрібно додати стерильну дистильовану воду, щоб плівка залишалася вологою.
Ультрафільтраційні центрифужні пробірки зазвичай неможливо стерилізувати та використовувати повторно.Оскільки ціна однієї пробірки недешева, багато людей намагаються використовувати її повторно – досвід показує, що поверхню мембрани багаторазово очищають дистильованою водою та центрифугують один або два рази.Маленьку пробірку, яку можна центрифугувати у зворотному напрямку, можна занурити в дистильовану воду, а потім центрифугувати у зворотному напрямку кілька разів, що буде краще.Його можна використовувати для того самого зразка неодноразово, і його можна замочувати в дистильованій воді, коли він не використовується, але слід запобігти бактеріальному забрудненню.Не змішуйте різні зразки.Деякі люди кажуть, що замочування в 20% спирті та 1n NaOH (гідроксид натрію) може запобігти росту бактерій і запобігти висиханню.Поки ультрафільтраційна мембрана проникає у воду, вона не може висохнути.Однак інші кажуть, що це зруйнує структуру мембрани.У будь-якому випадку виробники зазвичай не підтримують повторне використання.Повторне використання призведе до блокування розміру пор мембрани фільтра та навіть до витоку рідини, що вплине на результати експерименту.
Час публікації: 05 вересня 2022 р